La obtención de vacunas en la industria de la acuicultura se encuentra en una fase relativamente temprana de desarrollo, que ha resultado difícil para las enfermedades producidas por virus. Los virus de salmónidos producen importantes pérdidas anuales, y entre ellos, el virus de la necrosis pancreática infecciosa (IPNV), y de la necrosis hematopoyética infecciosa (IHNV) serán los modelos seleccionados para nuestros ensayos. El objetivo general de este proyecto es estudiar el potencial protector frente a estos virus de vacunas DNA que codifican las proteínas antigénicas de cada virus y de otras vacunas basadas en cápsidas vacías (VLPs). Se determinará la histopatología, la eficacia y distribución de la vacuna, permanencia, patrones de expresión de genes relacionados con el sistema inmune. Se estudiará también la posibilidad de inducir protección cruzada con una vacuna frente al virus heterólogo y su capacidad para eliminar/reducir los estados de persistencia viral y por tanto frenar la aparición de peces portadores asintomáticos del virus. Se utilizará preferentemente la administración oral por su novedad en este tipo de vacunas. Este sería el método óptimo de vacunación en acuicultura y en este proyecto, protegeremos los plásmidos con sales de alginato para evitar la degradación en el tracto digestivo del pez. La mayoría de los experimentos se llevarán a cabo en trucha arco iris y en ocasiones en trucha común. Para lograr nuestro propósito general se desarrollarán los siguientes objetivos:
1 Evaluar la eficacia de una serie de plásmidos de expresión que codifican proteínas inmunógenas de los virus IPNV e IHNV, respectivamente. Y dos tipos de VLPs frente a IPNV.
2. Estudiar los mecanismos de protección y la expresión de genes relacionados con respuesta inmune en peces vacunados oralmente.
3. Determinar la sinergia de la protección inducida por vacunación doble (IPNV/IHNV) frente a coinfecciones.
4. Estudiar las características de persistencia de los virus en los peces vacunados supervivientes.
In the aquaculture industry, vaccines are in a relatively early phase of development and for viral diseases, vaccine development has proven difficult. Salmonid fish viruses constitute annually an important cause of economic loss. Among them, infectious pancreatic necrosis virus (IPNV) and infectious haematopoietic necrosis virus (IHNV) have been selected here as models for the assay of vaccines. The main objective of this project is to study the protective potential of several DNA vaccines coding for antigenic proteins from each virus and also to test two other vaccines based on virus-like particles (VLPs). We will determine the effect on fish tissues, efficacy, location and duration of foreign gene expression, as well as the patterns of expression of genes related with the immune response and the antigen- specific antibodies produced. We will also investigate the feasibility of inducing cross-protection against the heterologous virus, the effects of dual vaccination against viral co-infections and the vaccine’s potential to eliminate or reduce the establishment of viral persistence and therefore, restrain the number of asymptomatic virus carrier-fish. Oral delivery will be the preferred route, because of its newness in DNA fish vaccines and because it would be the optimal method of immunization in fish farms. The plasmid vectors will be protected with alginate salts to avoid local degradation in the fish’s digestive system. Most of the experiments will be conducted in rainbow trout, and some in brown trout. The following specific objectives will be developed in order to fulfil the goal of our project:
- To evaluate the efficacy of several plasmid vectors coding for immunogenic proteins from IPNV or IHNV, respectively, and two types of VLPs against IPNV.
- To study the protection mechanisms and the gene expression related with immune responses in orally vaccinated and infected fish.
- To determine the synergy of protection induced by dual-vaccination against co-infections.
- To study the characteristics of the persistence of the viruses in vaccinated fish, survivors of infection.