Perkinsiosis en almeja: identificación molecular, patología producida e identificación de genes indicadores de resistencia o tolerancia a la infección

La infección por Perkinsus olseni, un protozoo parásito de declaración obligatoria para la OIE, es considerado como el patógeno mas relevante para el cultivo de almeja fina, y aunque también infecta a la almeja japonesa, esta parece no presentar mortalidades destacables. Mediante este estudio realizaremos un diagnóstico molecular para identificar posibles estirpes o cepas de este patógeno que pudieran presentar diferente grado de virulenta. Además realizaremos un estudio funcional en el que analizaremos y compararemos las relaciones hospedador-parásito en las dos especies de almeja, la fina y la japonesa, estudiando el modo de entrada en el hemocito y el desarrollo de la infección en las dos especies hospedadoras mediante técnicas de microscopía electrónica. Dado que los datos epidemiológicos existentes parecen indicar que la almeja japonesa es mas resistente al la perkinsosis que la almeja fina, se hará un estudio de expresión de genes relacionados con la respuesta inmune mediante el desarrollo de una genoteca substractiva (SSH) en almeja japonesa infectada con Perkinsus. Los datos obtenidos se compararán con los ya disponibles en nuestro equipo de investigación para la almeja fina. En este sentido, el proyecto se centrará en el estudio de genes que puedan estar relacionados con resistencia a enfermedades y sirvan como genes candidatos para la futura selección de estirpes resistentes. Estudiaremos el nivel de expresión y localización de los distintos genes seleccionados a lo largo del desarrollo en los distintos órganos mediante q-PCR, hibridación in situ, y técnicas de microscopía electrónica y confocal. Además se sintetizarán las proteínas recombinantes de los genes seleccionados para comprobar mediante ensayos funcionales, la modulación de la respuesta inmune de las almejas infectadas con Perkinsus, y su relación con la resistencia frente a la enfermedad